泡沫细胞相关基因4兔抗人多克隆抗体的制备

• 作者: 冯大明 孙文清 屈顺林 杨向东 王仁 郭芳
• 来源期刊: 中国动脉硬化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 病理学与病理生理学 泡沫细胞相关基因4蛋白 多肽合成 多克隆抗体 制备
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 263-266
• 页数: 4页
• 分类号: R363
• 字数: 3604字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-3949.2005.03.004

摘要

目的 探讨制备泡沫细胞相关基因4多克隆抗体的方法.方法 将从人胎肝文库经聚合酶链反应扩增获得的泡沫细胞相关基因4基因全长cDNA序列,通过生物信息学分析,预测泡沫细胞相关基因4编码氨基酸序列的二级结构、抗原决定簇、功能结构域,并进行了多序列比对,并根据蛋白质的亲疏水性、二级结构、偶联难度及实验难度等,确定泡沫细胞相关基因4抗原13肽PKLVKEEVFWRNY,采用固相多肽合成法合成该抗原片段,偶联后经过基础免疫,6次加强免疫,经追踪检测,于第四次免疫后10～14天颈动脉放血,分离血清,冷冻抽干,-20℃保存而制备了泡沫细胞相关基因4兔抗人多克隆抗体.结果 用固相多肽合成法成功制备了泡沫细胞相关基因4兔抗人多克隆抗体,该抗体经间接酶联免疫吸附测定法检测其效价为1:16 000,Western blot检测可见40kDa处有目的带,用免疫组织化学方法从HepG2细胞中检测到泡沫细胞相关基因4蛋白表达,证实该抗体具有较好的反应性和特异性.结论 固相多肽合成法省时、省力、制备的抗体效价高;泡沫细胞相关基因4兔抗人多克隆抗体的制备,为进一步研究泡沫细胞相关基因4蛋白在动脉粥样硬化中的功能作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	冯大明	南华大学医学院病理生理学教研室	17	61	4.0	7.0
2	杨向东	南华大学医学院心血管病研究所	44	222	8.0	12.0
3	王仁	南华大学医学院病理生理学教研室	19	59	4.0	6.0
4	郭芳	南华大学医学院病理生理学教研室	30	98	6.0	8.0
5	屈顺林	南华大学医学院病理生理学教研室	36	161	7.0	10.0
6	孙文清	南华大学医学院病理生理学教研室	19	53	5.0	5.0