用抗细胞表面分子单链抗体筛选和鉴别其相互作用肽

• 作者: 何一心 刘俊霞 宋增璇 李侠 许静 韩忠朝
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 单链抗体 T7噬菌体 肽
• 年，卷（期）: 2005,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 40-44
• 页数: 5页
• 分类号: Q81
• 字数: 3133字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8135.2005.07.007

摘要

展示于噬菌体表面的肽库适于用抗体筛选其特异性结合表达肽.scFv-C193是一个抗KG1a细胞表面分子的单链抗体,其抗原仍不清楚,为了筛选并鉴定其识别分子,用scFv-C193筛选了1个展示于T7噬菌体表面的人胎肝cDNA片段库.经4轮生物吸附后分离单个阳性噬斑,并对其表达产物做电泳分析及斑点杂交.结果鉴别出1个scFv-C193结合肽,scFv-C193+克隆噬菌体DNA插入片段的PCR扩增和序列分析结果表明它是1个43bpDNA片段表达产物.BLAST分析EST人类基因数据库,发现它97%相同于CD34+造血干/祖细胞mRNA的1～43bp,提示scFv-C193识别片段存在于人类造血干/祖细胞基因中,单克隆单链抗体scFv-C193可能用于研究这些人类基因的性质.