牛朊病毒正常蛋白特异性片段的克隆表达和纯化

• 作者: 尹少满 李炎鑫 田波 马贵平
• 来源期刊: 检验检疫科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 特异性 片段 纯化 克隆表达 聚合酶链式反应 DNA重组技术 牛 重组表达质粒 大肠杆菌 氧化复性 Cu2+ 目的蛋白 朊病毒蛋白 表达载体 基因插入 表达产物 高效表达 抗原特性 重组蛋白 包涵体 分子量 分析表 变性 引物 电泳
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 页码范围: 3-6
• 页数: 4页
• 分类号: Q78

摘要

[目的] 表达重组牛朊病毒正常蛋白特异性片段.[方法] 用所设计引物以聚合酶链式反应扩增出牛朊病毒正常蛋白特异性片段基因,利用DNA重组技术,将牛朊病毒正常蛋白特异性片段基因插入表达载体pET30a,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,将表达产物(包涵体)用8mol/L尿素溶解,在变性条件下用Cu2+氧化复性纯化.[结果] 重组表达质粒在大肠杆菌中得到了高效表达,目的蛋白分子量约为15KD,Western blotting分析表明,目的蛋白具有朊病毒蛋白的抗原特性,变性条件下用Cu2+氧化复性纯化得到电泳纯的重组蛋白.[结论] 这一工作为下一步制备抗体和进行结构、功能的研究打下扎实基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马贵平		50	217	7.0	13.0
2	李炎鑫		31	116	5.0	10.0
3	尹少满		1	0	0.0	0.0
4	田波		1	0	0.0	0.0