猪瘟病毒E2基因真核表达载体表达效率和免疫效果的比较

• 作者: 刘明羽 张富春 张馨玉 杨福 涂亦娴 王宾 金华利
• 来源期刊: 中国农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 真核表达 猪瘟病毒 E2n基因 抗体 淋巴细胞增殖
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 生物科学
• 页码范围: 37-41
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11|S852.4|S852.65
• 字数: 3845字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1007-4333.2005.06.009

摘要

比较猪瘟病毒E2基因的真核表达质粒proVAX-E2n和pVP22-E2n体外表达效率以及体内的免疫效果,以从中选出高效的猪瘟病毒核酸疫苗.将上述表达载体转染Hela细胞进行体外表达后,用RT-PCR和间接ELISA法检测Hela细胞体内和体外表达产物;免疫6～8周龄昆明白小鼠, 用间接ELISA法和MTS法检测小鼠血清中CSFV特异性IgG抗体水平以及脾脏中淋巴细胞增殖功能.结果表明2种E2重组质粒均能在Hela细胞中正确表达,且proVAX-E2n的E2蛋白表达量(OD值为0.575 4)明显高于pVP22-E2n(OD值为0.306 05)(P<0.05);proVAX-E2n刺激机体产生的抗体水平(最高抗体滴度为1:2 200)显著高于pVP22-E2n免疫组(最高抗体滴度1:1 600);淋巴细胞增殖结果显示proVAX-E2n(刺激指数4.073)与pVP22-E2n(刺激指数2.205)相比,能诱发小鼠产生更强的CSFV的特异性淋巴细胞增殖反应.本研究表明proVAX真核表达载体对E2基因体外表达效率和小鼠免疫效果均高于pVP22真核表达载体.