人BDNF重组逆转录病毒载体的构建

• 作者: 林月秋 汤逊 蔡培强 阳运康
• 来源期刊: 中国骨肿瘤骨病
• 学科: 医学
• 关键词: h.BDNF 基因克隆 重组逆转录病毒载体 质粒
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 224-227
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 2744字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-252X.2005.04.012

摘要

目的构建PLEGFP-BDNF真核表达重组逆转录病毒,为进一步在细胞中表达及移植治疗作准备.方法按照hBDNF基因全长编码序列设计合成引物,从人基因组DNA中扩增出744bp的hBDNF基因片段,插入到PMD18-T载体上,转化DH5α大肠杆菌菌株,获得PMD18T-BDNF克隆,对该克隆进行 限制性酶切分析和DNA序列测定;从阳性克隆中获取hBDNF全长编码片段,与真核表达载体PLEGFP质粒连接,构建PLEGFP-BDNF真核表达重组质粒.重组质粒转化大肠杆菌JM109,再经氨苄LB培养基筛选,酶切,PCR与测序鉴定.结果PLEGFP-BDNF重组逆转录病毒构建成功.结论hBDNF在大肠杆菌中的成功表达在转基因治疗CNS病变方面具有潜在应用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	阳运康	四川省泸州医学院附属医院骨科	5	11	2.0	3.0