大鼠BDNF基因克隆和重组逆转录病毒pLXSN-BDNF的构建

• 作者: 原慧萍 周欣荣 曲巍 李鸿翼 杨滨滨 邵正波
• 来源期刊: 眼科新进展
• 学科: 医学
• 关键词: 脑源性神经营养因子 逆转录病毒载体 基因治疗
• 年，卷（期）: 2006,（11）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 814-817
• 页数: 4页
• 分类号: R373
• 字数: 4399字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-5141.2006.11.004

摘要

目的 克隆大鼠脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factors,BDNF)基因并构建含BDNF基因片段的真核表达载体pLXSN-BDNF,用于视神经损伤修复的基因治疗.方法 利用RT-PCR的方法从大鼠海马组织的总RNA中扩增BDNF基因片段,序列两端分别引入限制性内切酶识别位点EcoR Ⅰ和Xho Ⅰ,并将其定向克隆入pMD18-T Smple载体,测序正确后亚克隆入逆转录病毒载体pLXSN.结果 经过PCR、酶切和测序鉴定,所克隆的BDNF基因序列正确,克隆的BDNF基因已经正确插入到逆转录病毒载体pLXSN中.结论 成功克隆了BDNF基因并且构建了真核表达载体pLXSN-BDNF,为进一步研究基因治疗视神经损伤疾病奠定基础.