BDNF基因逆转录表达载体的构建和在淋巴细胞中的表达

• 作者: 冯鉴强 叶美红 周继斌 唐小卿 李平阳 郭瑞鲜
• 来源期刊: 中山大学学报(医学科学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 逆转录表达载体 脑源性神经营养因子 淋巴细胞
• 年，卷（期）: 2003,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 421-424,428
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3723字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1672-3554.2003.05.002

摘要

[目的]构建含脑源性神经营养因子基因( brain- derived neurotrophic factor ,BDNF gene)逆转录表达载体并了解其在淋巴细胞中的表达,探讨治疗基因的非损伤性脑内转移的新途径.[方法] 用 RT- PCR方法从大鼠海马组织总 RNA中扩增 (cDNA) BDNF片段,应用基因重组技术将大鼠 (cDNA) BDNF克隆到逆转录病毒载体 pLXSN中,用限制性内切酶酶切分析和 DNA测序对重组质粒进行鉴定,采用 LipofectAMINE将重组大鼠 (cDNA) BDNF导入 PA317细胞,获取高滴度的病毒上清转染大鼠淋巴细胞,应用流式细胞仪( FCM)检测大鼠淋巴细胞 BDNF的表达,噻唑蓝 (MTT)法检测淋巴细胞培养上清对 PC12细胞增殖的影响.[结果] 扩增出大鼠 (cDNA) BDNF片段,限制性内切酶酶切和 DNA测序证实获得正确的重组质粒 pLXSN- BDNF, BDNF基因修饰的大鼠淋巴细胞能高表达 BDNF蛋白,其培养上清能促进 PC12细胞增殖.[结论] 成功构建了 BDNF基因逆转录表达载体, BDNF基因修饰的大鼠淋巴细胞能高表达和分泌具有生物活性的 BDNF蛋白,为治疗基因的非损伤性脑内转移奠定了一定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	冯鉴强	中山大学中山医学院生理学教研室	77	514	13.0	18.0
2	郭瑞鲜	中山大学中山医学院生理学教研室	34	186	8.0	11.0
3	李平阳	中山大学中山医学院生理学教研室	11	56	5.0	7.0
4	叶美红	中山大学中山医学院生理学教研室	18	168	8.0	12.0
5	唐小卿	中山大学中山医学院生理学教研室	14	253	9.0	14.0
6	周继斌	中山大学中山医学院生理学教研室	1	5	1.0	1.0