两种端粒酶逆转录酶启动子真核表达载体的构建

• 作者: 刘华 刘素侠 吴伟芳 张艳 朱法良 杨咏梅 王晓燕 韩丽辉 马春红 高立芬
• 来源期刊: 中国现代普通外科进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 端粒酶逆转录酶·启动子·基因表达·基因融合·肝炎病毒 乙型
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 212-215
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 4458字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-9905.2005.04.008

摘要

目的:构建hTERT启动子和保留HBV同源序列的缺失点变hTERT启动子(pGL3-del445)的真核表达载体,为进一步研究HBV与hTERT启动子的关系奠定实验基础.方法:通过双酶切及PCR方法从pCR-TRTP载体上将全长及含有HBV同源序列的hTERT启动子的基因序列克隆到pPL-basic多克隆位点上,构建真核表达载体pGL3-TRTP与pGL3B-del445,将该两质粒与pRL-tk共转染不同细胞系,评估其端粒酶启动子活性.结果:经测序证明成功构建了全长及含有HBV同源序列的hTERT启动子的真核表达载体pGL3-TRTP和pGL3B-del445,共转染实验中,证实在永生细胞系中重组子高效表达,在非永生正常细胞中重组子不表达.结论:构建的两种重组表达载体具有端粒酶启动子活性,在不同端粒酶表型的细胞系中其表达具有选择性.