牡山羊草Aegilops juvenalis Puroindoline b基因的克隆

• 来源期刊: 武汉植物学研究
• 学科: 农学
• 关键词: 牡山羊草 Puroindoline b 籽粒硬度 克隆
• 年，卷（期）: 2005,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 401-405
• 页数: 5页
• 分类号: Q78|S512
• 字数: 4550字
• 语种: 中文

摘要

Puroindoline a (Pina)和puroindoline b (Pinb)是控制小麦籽粒硬度的主效基因.根据已报道的小麦Pinb基因的保守序列,设计合成了一对特异性引物,对六倍体牡山羊草Aegilops juvenalis (UUMMDD)的基因组DNA和胚乳cDNA进行Pinb基因扩增、克隆和序列测定,发现了两个新型Pinb等位基因Pinb-allele-1和Pinb-allele-2.该基因全长360 bp,编码119个氨基酸残基.它编码的蛋白和麦类作物Puroindoline B(PinB)的成熟蛋白有非常高的同源性,具有麦类作物PinB蛋白所特有的WPTKWWK的色氨酸结构域和10个半胱氨酸所形成的5个二硫键结构.与软粒小麦cv.Capitole的Pinb-D1a相比较,其核苷酸同源性为93.1%、 93.3%,氨基酸同源性为90.8%、92.4%.Pinb-allele-1和Pinb-allele-2分别含有11和9个氨基酸变异位点.RT-PCR证实了Pinb-allele-2基因在籽粒胚乳中的表达.Southern Blot分析结果表明,牡山羊草中含有两个拷贝的Pinb基因,其中包含着与小麦差异较大的籽粒硬度控制基因.