人MRG15基因荧光真核表达载体的构建及其在培养人晶状体上皮细胞的表达

• 作者: 刘新平 刘燕 周健 张健 张自峰 惠延年 王雨生 药立波
• 来源期刊: 眼科新进展
• 学科: 医学
• 关键词: 人MRG15基因 克隆 年龄相关性白内障 培养人晶状体上皮细胞
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 212-215
• 页数: 4页
• 分类号: R774.1
• 字数: 3163字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-5141.2005.03.005

摘要

目的克隆人MRG15(MORF4-related gene on chromosome 15)的编码基因,构建荧光表达载体,并检测其在培养人晶状体上皮细胞中的表达,为研究MRG15与年龄相关性白内障(age related cataract,ARC)的相关性奠定基础.方法用RT-PCR的方法从人ARC的晶状体前囊膜中扩增MRG15的编码基因,克隆至pMD18-T载体并测序,结果正确后亚克隆至荧光真核表达载体pEGFP-N2中,酶切鉴定正确后采用脂质体法,瞬时转染培养人晶状体上皮细胞,荧光显微镜下检测MRG15-pEGFP-N2的定位.结果测序证实,从人ARC晶状体前囊膜中扩增出的MRG15 编码基因的序列及读框全部正确.重组质粒MRG15-pEGFP-N2经酶切后产生与理论预期长度相符的片段.脂质体法转染后24 h,观察到其主要在培养人晶状体上皮细胞的细胞核中表达.结论克隆了人MRG15的编码基因,成功构建了荧光真核表达载体MRG15-pEGFP-N2,并可在培养人晶状体上皮细胞中表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	药立波	第四军医大学基础部生物化学与分子生物教研室	160	1030	16.0	24.0
2	刘新平	第四军医大学基础部生物化学与分子生物教研室	133	841	16.0	23.0
3	张健	第四军医大学基础部生物化学与分子生物教研室	57	236	8.0	11.0