犬冠状病毒TN449株M基因的克隆与转移载体的构建

• 作者: 吕彩云 张建武 李健 林矫矫 王权 胡永强 薛飞群 陈燕军
• 来源期刊: 中国兽医科技
• 学科: 农学
• 关键词: 犬冠状病毒 膜蛋白 克隆 转移载体
• 年，卷（期）: 2005,（8）
• 所属期刊栏目: 微生物学
• 页码范围: 590-594
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.6|Q785
• 字数: 3401字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2005.08.002

摘要

用蔗糖密度梯度离心纯化犬冠状病毒TN449株病毒液,提取总RNA并反转录,同时设计1对5′端加有BamHⅠ和HindⅢ内切酶位点的引物,对病毒cDNA进行了PCR扩增,回收PCR产物将其连接入pGEM-T Easy载体并转化大肠埃希氏菌.并对阳性重组质粒菌测序和序列分析.结果,犬冠状病毒与牛冠状病毒、猫冠状病毒、猫传染性腹膜炎病毒、人冠状病毒、鸡传染性支气管炎病毒、鼠传染性肝炎病毒、猪呼吸道冠状病毒、人重症急性呼吸道综合征病毒和猪胃肠炎病毒的同源性分别是39.39%、85.41%、83.98%、36.80%、26.64%、37.23%、93.51%、29.00%和94.81%;犬冠状病毒M蛋白有3个疏水性结构域.同时构建了pET28a-CCV-M表达质粒.