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摘要:
应用RT-PCR技术分别从脂多糖(LPS)活化的牛脾脏细胞和肺泡巨噬细胞中克隆到编码牛白细胞介素(bIL-)18成熟蛋白的cDNA基因,其大小为480 bp.将bIL-18克隆到pET32a(+)质粒中,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导后进行SDS-PAGE分析,得到了分子量为38ku的融合蛋白,该蛋白经纯化并复性后,具有诱导MDBK分泌IFN-γ的活性,并且可以刺激ConA活化的外周血单核细胞(PBMC)增殖.使用半定量RT-PCR对其mRNA的体内表达进行了测定,发现不论是否加入刺激剂,牛巨噬细胞都可以持续的表达IL-18 mRNA,但是被LPS活化的PBMC只有微弱表达,肝和脾细胞经LPS活化后也可以检测到IL-18 mRNA的表达,其水平明显高于PBMC,在不同细胞中表达的差异可能反映了其产生成熟IL-18的能力.
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文献信息
篇名 牛白细胞介素18成熟蛋白cDNA基因的克隆和表达
来源期刊 畜牧兽医学报 学科 农学
关键词 白细胞介素18 RT-PCR
年,卷(期) 2005,(9) 所属期刊栏目 畜牧
研究方向 页码范围 873-876
页数 4页 分类号 S852
字数 3033字 语种 中文
DOI 10.3321/j.issn:0366-6964.2005.09.003
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 赵宏坤 山东农业大学动物科技学院 109 1204 18.0 28.0
3 仲跻峰 山东省农业科学院奶牛研究中心 137 888 15.0 20.0
4 高运东 山东省农业科学院奶牛研究中心 72 515 12.0 18.0
5 胡敬东 山东农业大学动物科技学院 32 228 9.0 14.0
6 杨少华 山东省农业科学院奶牛研究中心 48 391 12.0 17.0
7 刘文强 山东农业大学动物科技学院 9 128 7.0 9.0
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研究主题发展历程
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白细胞介素18
RT-PCR
研究起点
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期刊影响力
畜牧兽医学报
月刊
0366-6964
11-1985/S
大16开
北京海淀区圆明园西路2号
82-453
1956
chi
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