猪白细胞介素18成熟蛋白基因克隆及在不同原核表达系统中的表达

• 作者: 崔保安 方忠意 贾云飞 郑兰兰 陈瑞亮 陈红英
• 来源期刊: 华南农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪白细胞介素18 成熟蛋白 原核表达
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 动物科学与兽医学
• 页码范围: 75-79
• 页数: 5页
• 分类号: S831
• 字数: 4094字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-411X.2008.03.018

摘要

RT-PCR方法直接从猪脾脏淋巴细胞中扩增出猪白细胞介素18成熟蛋白基因的cDNA,克隆到pGEM-T载体,构建重组质粒pGEM-T pIL18,转化E.coli JM109感受态细胞,取PCR和酶切鉴定为阳性的重组质粒进行序列测定.测序结果表明,pIL-18成熟蛋白基因核苷酸长度为474 bp,编码157个氨基酸.将其分别克隆到表达载体pQE30、pET-28a、pGEX6P-1中,构建重组表达质粒pQE-mpIL18、pET-mpIL18、pGEX-mpIL18.用IPTG诱导表达,重组菌菌体裂解物SDS-PAGE可检测到相对分子质量分别为19 000、21 000、45 000的重组蛋白.经薄层扫描分析,pQE-mpIL18、pET-mpIL18、pGEX-mpIL18菌体裂解物分别占菌体总蛋白的17%、28%、27%,均以包涵体形式存在.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈红英	河南农业大学牧医工程学院	168	646	12.0	16.0
5	崔保安	河南农业大学牧医工程学院	274	2313	25.0	33.0
9	陈瑞亮	河南农业大学牧医工程学院	4	5	1.0	2.0
10	郑兰兰	河南农业大学牧医工程学院	17	27	4.0	5.0
12	贾云飞	河南农业大学牧医工程学院	22	29	4.0	5.0
15	方忠意		5	15	1.0	3.0