汉坦病毒H8205株IL-2/G1融合基因在Vero细胞中的稳定表达

• 作者: 刘广 张泽华 胡洪波 贾珉 黄汉菊
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 汉坦病毒 Vero细胞 融合蛋白 稳定表达
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 120-123
• 页数: 4页
• 分类号: R373
• 字数: 3300字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3619.2005.02.003

摘要

目的探讨外源性 IL- 2/G1融合基因在非洲绿猴肾细胞( Vero)获得稳定表达的可行性,为汉坦病毒基因工程疫苗的研制提供一定的实验基础.方法将汉坦病毒 H8205株 G1的 cDNA重组人源 IL- 2基因后克隆到真核表达载体 pcDNA3.1/His,形成重组真核表达质粒 pcDNA3.1/His- IL- 2- G1,在脂质体介导下,将其导入 Vero细胞,通过 G418筛选获得阳性克隆,并继续培养 6周,然后通过间接免疫荧光、 ELSIA、 SDS- PAGE电泳等方法检测 IL- 2- G1基因在 Vero细胞中的稳定表达情况.结果成功构建重组质粒 pcDNA3.1/His - IL- 2- G1,其片段插入方向正确.经间接免疫荧光和 SDS- PAGE电泳证实,转染了真核表达质粒 pcDNA3.1/His- IL- 2- G1后在 Vero细胞培养上清和胞浆中有融合蛋白的表达,其相对分子量为 78 000 u,与预期的相符合.经人 IL- 2 ELISA检测试剂盒检测证实在培养上清和细胞裂解物所表达的融合蛋白有 IL- 2特性. 结论在脂质体介导下,外源性 IL- 2/G1融合基因能够成功导入 Vero细胞并获得稳定表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张泽华	华中科技大学同济医学院基础医学院病原生物学系微生物学教研室	4	8	1.0	2.0
2	黄汉菊	华中科技大学同济医学院基础医学院病原生物学系微生物学教研室	46	170	7.0	11.0
3	贾珉	华中科技大学同济医学院基础医学院病原生物学系微生物学教研室	6	17	2.0	4.0
4	胡洪波	华中科技大学同济医学院基础医学院病原生物学系微生物学教研室	3	8	1.0	2.0
5	刘广	华中科技大学同济医学院基础医学院病原生物学系微生物学教研室	1	0	0.0	0.0