结核分枝杆菌Hsp65与IL-2融合蛋白稳定表达细胞系的建立

• 作者: 师长宏 席丽 张海 王丽梅 王晓武 赵勇
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分枝杆菌 真核表达 热休克蛋白65 白细胞介素2 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2008,（8）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 718-721
• 页数: 4页
• 分类号: R378.91
• 字数: 3296字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2008.08.007

摘要

目的 构建了表达结核分枝杆菌Hsp65与IL-2融合蛋白的真核表达载体;获得重组质粒稳定转染的P815细胞系.方法 将Hsp65与IL-2基因分别克隆至真核表达载体pcDNA3.1,转化DH5α菌株感受态细胞,获得阳性重组质粒Hsp65-IL-2-pcDNA3.1.在阳离子聚合物作用下,重组质粒转染与BALB/c遗传背景一致的P815(H-2d)细胞.G418筛选抗性克隆,免疫荧光检测融合蛋白的表达.结果 真核质粒转染的阳性克隆细胞,经RT-PCR检测到Hsp65与IL-2融合蛋白mRNA水平的表达,分别用抗Hsp65和IL-2的单抗进行间接免疫荧光检测,可在转染重组质粒的P815细胞膜上观察到较强的绿色荧光.结论 获得表达Hsp65与IL-2融合蛋白的稳定细胞系,为其CTL研究提供了合适的靶细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王丽梅	第四军医大学基础部微生物学教研室	57	187	7.0	10.0
2	师长宏	第四军医大学实验动物研究中心	145	694	13.0	16.0
3	张海	第四军医大学实验动物研究中心	87	511	12.0	18.0
4	席丽	第四军医大学实验动物研究中心	5	13	3.0	3.0
5	王晓武	第四军医大学实验动物研究中心	40	202	7.0	12.0
6	赵勇	第四军医大学实验动物研究中心	74	352	10.0	14.0