野生型及突变型survivin基因重组逆转录病毒的构建及表达研究

• 作者: 宋建勋 杨晓亚 白云
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: survivin基因 野生型 突变型 逆转录病毒载体
• 年，卷（期）: 2005,（8）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 691-693
• 页数: 3页
• 分类号: R373|R394-33|R394.3
• 字数: 2658字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2005.08.001

摘要

目的构建含绿色荧光蛋白和野生型及第34位氨基酸突变型survivin基因的双顺反子逆转录病毒载体,并进行真核细胞表达.方法用PCR的方法由含survivin基因的真核表达载体扩增所需目的片段,然后将该片段插入逆转录病毒载体pMIG.酶切鉴定重组子,脂质体介导下转染包装细胞Phoenix E,病毒上清感染NIH3T3细胞,RT-PCR检测外源基因mRNA的表达、流式细胞仪检测GFP的表达从而确认外源基因的转录.结果经琼脂糖凝胶电泳鉴定,目的片段成功的连接到pMIG载体上.载体转染NIH3T3细胞,RT-PCR显示目的片段mRNA能够表达,流式细胞仪检测GFP获良好的表达.结论成功构建了人survivin基因野生型及突变型逆转录病毒,并在NIH3T3细胞进行了表达,为下一步的研究工作提供了有效的分子工具,并且为将来能在体内应用抑制survivin基因表达的肿瘤治疗奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	白云	第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室	99	429	11.0	15.0
2	杨晓亚	第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室	9	40	3.0	6.0
3	宋建勋	第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所	9	16	3.0	3.0