p21waf1基因的克隆及在大肠杆菌中的高效表达

• 作者: 刘力华 姜艳芳 方艳秋 许淑芬 谭岩 赵平伟
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 原癌基因蛋白质p21(ras) 克隆,分子 基因表达
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 209-212
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 2717字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-587X.2005.02.015

摘要

目的:构建人p21waf1基因的原核表达载体并在大肠杆菌JM109中高效表达.方法:从人肝细胞中分离总RNA,经逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)得到p21waf1全基因.用原核细胞表达载体构建了pBV220/p21waf1重组质粒,经DNA测序确认后,将其转化到大肠杆菌JM109进行表达、初步纯化.结果:SDS-PAGE凝胶电泳分离显示在分子量21 000处有一诱导蛋白带,薄层扫描显示表达产物在诱导5 h时可达细菌总蛋白的38%,Westernblotting证明表达产物与抗人P21waf1单克隆抗体有特异性免疫反应.结论:成功构建出p21waf1表达载体,诱导产生蛋白经检测证实为P21waf1蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谭岩	吉林大学第一医院中心实验室	135	608	9.0	17.0
2	姜艳芳	吉林大学第一医院中心实验室	59	187	6.0	10.0
3	刘力华	吉林大学第一医院中心实验室	51	162	6.0	9.0
4	方艳秋	吉林大学第一医院中心实验室	76	250	7.0	11.0
5	许淑芬	吉林大学第一医院中心实验室	37	200	6.0	13.0
6	赵平伟	吉林大学第四医院肝胆外科	13	48	4.0	6.0