LMW-GS16基因表达载体的构建

• 作者: 李琴 武丽敏 江千涛 郑有良 魏育明
• 来源期刊: 吉林农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 表达载体 LMW-GS基因 pBI121-16
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 381-384
• 页数: 4页
• 分类号: Q782
• 字数: 2491字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-5684.2005.04.008

摘要

采用PCR方法对来自大麦的LMW-GS16基因进行修饰,在基因5′及3′端分别加入构建表达载体所需的BamHI和SacI限制酶切位点,并将其连接在相应酶切的质粒pBI121上,构建成LMW-GS植物表达载体pBI121-16.重组质粒转化到E.coli DH5α和农杆菌LBA4404中,通过Kanamycin筛选阳性克隆,用PCR方法进行鉴定.对照组转化率为零,转化组阳性克隆特异地扩增出900bp片段,与目标基因DNA大小一致,转化率为1.0×106/μgDNA.