库尔勒香梨的苹果褪绿叶斑病毒cDNA探针检测技术研究

• 作者: 朱军 牛建新 马兵钢
• 来源期刊: 西北农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 库尔勒香梨 苹果褪绿叶斑病毒 cDNA探针
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 页码范围: 58-63
• 页数: 6页
• 分类号: S436.612.1+9
• 字数: 4654字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-1389.2005.02.013

摘要

以库尔勒香梨叶片和皮层为材料,对两种植物总RNA提取方法进行了比较研究,从中筛选出了适合库尔勒香梨的提取方法;并利用RT-PCR反应体系成功合成了生物素标记的cDNA探针,在此基础上,对影响杂交灵敏度的主要因素进行了实验研究.结果表明,当探针浓度为400 ng/mL,甲酰胺浓度为45%,42 C杂交反应6 h,可获得最高灵敏度.Tween20的封闭效果比牛血清白蛋白好.对不同组织和不同提取方法提取的总RNA进行了杂交检测,并对库尔勒地区香梨带毒情况进行了检测.结果表明,不论幼叶、老叶、皮层及冷冻叶片均可出现杂交信号,两种提取方法提取的总RNA也都出现了杂交信号,库尔勒香梨样品有45%的带苹果褪绿叶斑病毒.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱军	石河子大学农学院园艺系	2	17	2.0	2.0