人源新基因hGlyrichin的克隆及其功能的初步研究

• 作者: 侯冰 尹丽莉 张咏 李红梅 杨超文 沙继斌 赵光 赵士富 赵彦林 赵蕾 鱼咏涛
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 生物学
• 关键词: hGlyrichin 抗生素类,肽 基因表达 聚合酶链反应 甘氨酸
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 501-505
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 4260字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2005.06.001

摘要

目的:克隆获得与mL52新基因(GenBank:AY028425)同源人类新基因hGlyrichin,并研究其功能.方法:采用PCR法从人胎肝cDNA文库中扩增出该新基因,因富含甘氨酸而命名为hGlyrichin,以RT-PCR和Northern杂交分析在多种细胞株中的表达及转录本大小,并对该基因进行生物信息学分析,利用pET22b表达载体构建重组质粒pET22b-hGlyrichin,转化大肠杆菌BL-21(DE3)中进行IPTG诱导表达.结果与结论:电子PCR证实该基因定位于人染色体20q11.22,包含3个外显子和2个内含子.Northern杂交结果显示为单一转录本,大小约600 bp,与mL52全长cDNA长度相符.所编码的蛋白为含有疏水区的小分子阳离子蛋白,相对分子质量和等电点分别为8 182.83和9.58,二级结构(Garnier-Robson模型)预测是以β折叠型为主,这些特点与目前已知的大多数阳离子抗菌肽的结构及部分理化特性极为类似,该基因转化后的大肠杆菌在IPTG诱导表达时的生长受到明显抑制,初步证实了hGlyrichin具有明显的抗菌活性.