应用nested和touch down PCR技术分离牦牛CAPN1大亚基基因EST

• 作者: 刘雅楠 吴建平 张利平 徐明旭 汪虹英 蔡欣
• 来源期刊: 西北农林科技大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: nested和touch-down PCR EST分离 CAPN1大亚基基因 牦牛
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 所属期刊栏目: 动物科学与动物医学
• 页码范围: 14-18
• 页数: 5页
• 分类号: Q343
• 字数: 3111字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1671-9387.2005.02.004

摘要

钙激活中性蛋白酶1(CAPN1)基因是影响肉嫩度的侯选基因.根据GeneBank中已公布的CAPN1基因cDNA序列设计同源PCR引物,通过RT,nested和touch-down PCR技术从牦牛肌肉组织总RNA中分离目的序列,与pGEM-T-easy载体连接后转化DH5α感受态菌株,通过PCR扩增、限制性酶切和测序分析鉴定阳性克隆.分离到的基因片段为牦牛CAPN1大亚基的部分编码序列,在GeneBank中的注册号为AY197555,与奶牛、人、食蟹猴、小鼠、绵羊以及大鼠相应序列的同源性分别为98%,89%,89%,83%,96%和81%,在不同物种之间具有较强的保守性.CAPN1基因EST的分离为进一步研究牦牛CAPN1基因奠定了基础.此研究表明,在总RNA质量不理想的情况下,同时采用这2种技术可以较大限度地获取目的序列.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴建平	甘肃农业大学动物科技学院	155	1088	16.0	24.0
2	张利平	甘肃农业大学动物科技学院	117	784	15.0	22.0
3	蔡欣	西北农林科技大学生命科学学院	7	57	4.0	7.0
4	徐明旭	北京大学人类疾病基因研究中心	6	37	4.0	6.0
5	汪虹英		1	11	1.0	1.0
6	刘雅楠	北京大学人类疾病基因研究中心	3	41	3.0	3.0