应用绿色荧光蛋白基因标记细菌进行生物膜结构定量化新方法

• 来源期刊: 环境科学
• 学科: 地球科学
• 关键词: 绿色荧光蛋白 大肠杆菌 生物膜
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 页码范围: 160-164
• 页数: 5页
• 分类号: X172
• 字数: 4215字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0250-3301.2005.04.032

摘要

绿色荧光蛋白基因pEGFP经CaCl2转化法标记E.coli JM109菌株,获得的标记菌株作为模式细菌接种含50μg/mL氨苄的LB培养基,在摇瓶中与火山岩颗粒共混培养挂膜(37℃,120 r/min,16 h).用激光共聚焦扫描显微镜摄取获得火山岩填料生物膜250μm×250μm区域不同层面的图片堆,所获图片堆经COMSTAT程序处理可以获得相关的定量化参数,如16 h生物膜平均厚度为0.120 844 μm,生物膜最大厚度为10.5μm,生物膜体积为0.136 986μm3/μm2,生物膜表面积21 338.1μm2,生物膜比表面积为3.36 854μm2/μm3.该方法也可以扩展至其他绿色荧光蛋白基因标记细菌的生物膜结构定量化.