卡波济肉瘤相关疱疹病毒包膜糖蛋白K8.1B全长cDNA的克隆及在真核细胞中的表达

• 作者: 卢春 唐桂霞 张玲 曾怡 秦娣 钱超
• 来源期刊: 南京医科大学学报（自然科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 卡波济肉瘤相关疱疹病毒 K8.1B RT-PCR 免疫荧光染色
• 年，卷（期）: 2005,（9）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 616-619
• 页数: 4页
• 分类号: R739.5|R373.11
• 字数: 3096字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4368.2005.09.002

摘要

目的:分离、克隆卡波济肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)包膜糖蛋白K8.1B全长cDNA,并将其置于真核细胞中进行表达.方法:用K8.1B基因设计一对PCR引物,其5'端分别引入BamH Ⅰ和Xho Ⅰ酶切位点.以佛波酯(TPA)刺激的原发性渗出性淋巴瘤(PEL)细胞系BCBL-1细胞总RNA为模板,通过RT-PCR扩增KSHV K8.1B编码序列,经双酶切后克隆进pcDNA3.1(+)载体中,构建含K8.1B cDNA的重组真核表达质粒.重组质粒经酶切鉴定、核酸序列测定和分析后转染人胚肾293细胞,经G418筛选获细胞克隆.用间接免疫荧光染色(IFA)检测K8.1B cDNA编码蛋白在293细胞中的表达状况.结果:RT-PCR分离、克隆的K8.1B cDNA全长501 bp,核酸序列分析显示,该基因与Genbank中已登记的K8.1B编码基因呈现100%同源性.经IFA证实该重组蛋白为KSHV K8.1B特异性蛋白.结论:KSHV包膜糖蛋白K8.1B编码cDNA在293细胞中获得了正确表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卢春	南京医科大学微生物学与免疫学系	92	236	7.0	9.0
2	唐桂霞	南京医科大学微生物学与免疫学系	17	62	5.0	6.0
3	曾怡	南京医科大学微生物学与免疫学系	27	93	5.0	6.0
4	钱超	南京医科大学微生物学与免疫学系	14	42	4.0	5.0
5	张玲	南京医科大学微生物学与免疫学系	57	262	9.0	13.0
6	秦娣	南京医科大学微生物学与免疫学系	22	40	4.0	4.0