卡波济肉瘤相关疱疹病毒潜伏相关核抗原编码基因的克隆及表达

• 作者: 卢春 曾怡 黄丽
• 来源期刊: 南京医科大学学报(自然科学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 卡波济肉瘤相关疱疹病毒 潜伏相关核抗原(LANA) ORF73C 原核表达
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 病原生物学与免疫学研究专题
• 页码范围: 292-296
• 页数: 5页
• 分类号: R373.1+1
• 字数: 3701字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4368.2004.03.030

摘要

目的:分离卡波济肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)潜伏相关核心抗原(LANA)羧基端基因(0RF73C),并在大肠杆菌中克隆和表达.方法:设计一对PCR引物,在引物的5′端分别引入BamH I和EcoR I酶切位点,提取稳定状态的BCBL-1细胞的总DNA作模板,通过PCR扩增KSHV ORF73C,PCR产物经双酶切后按正确的读码框克隆进原核表达质粒pGEX-6p-1中,并转化大肠杆菌感受态细胞BL21,以异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合蛋白.结果:经核酸序列测定及分析,分离、克隆的ORF73C基因与基因数据库中登记的ORF73基因的羧基端的621bp的序列有99%同源性.经IPTG诱导的重组质粒转化菌体SDS-聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳显示有大小约为46ku的融合蛋白表达.结论:初步表明ORF73C基因在大肠杆菌中获得正确表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卢春	南京医科大学微生物学与免疫学系	92	236	7.0	9.0
2	曾怡	南京医科大学微生物学与免疫学系	27	93	5.0	6.0
3	黄丽	南京医科大学微生物学与免疫学系	16	79	5.0	7.0