细胞角蛋白20单克隆抗体纯化方法的探讨

• 作者: 刘彦慧 吴小候 罗春丽 蔡晓钟
• 来源期刊: 中国医学检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: CK20单克隆抗体 SPA-Sepharose Western-blotting
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 17-18
• 页数: 2页
• 分类号: R392.11
• 语种: 中文

摘要

[目的] 探讨细胞角蛋白20(CK20)单克隆抗体纯化的方法.[方法] 采用SPA-Sepharose CL-4B为固定相的亲和层析法,将含有CK20单抗的小鼠腹水过柱后,用pH 6.0、4.0和3.0 3个范围 0.1 mol/L 枸橼酸分步洗脱,并以双向琼脂扩散法和Western-blotting对获得的单抗加以鉴定.[结果] 以枸橼酸3个pH范围洗柱时分别收集 5 ml、4 ml 和 20 ml 洗脱液,双向琼脂扩散法鉴定结果是:pH 6.0时洗脱液中单抗亚型是IgG1、pH 4.0时为IgG2a、pH 3.0时为IgG2b,Western-blotting结果表明所获抗体具有较高免疫活性.[结论] 该方法简便、特异,并可直接获得不同亚型单抗,适合腹水中CK20单克隆抗体纯化.