NGAL基因5'侧翼区启动子区的克隆与鉴定

• 作者: 方栩佳 李恩民 牛永东 许丽艳 许晓玲 陈波 黄瑞燕
• 来源期刊: 肿瘤防治研究
• 学科: 医学
• 关键词: 启动子 NGAL 肿瘤细胞 基因表达调控 荧光素酶
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 325-328
• 页数: 4页
• 分类号: Q784|R735.1
• 字数: 3688字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3971/j.issn.1000-8578.2005.06.001

摘要

目的对NGAL(neutrophil gelatinase-associated lipocalin)基因5′侧翼区的转录调控启动子区进行分段定位鉴定.方法将NGAL基因5'侧翼区-416～+84和-152～+84两个区段分别克隆至专门用于研究启动子的报告基因表达载体pGL3-Enhancer(pGLE)中,构建表达载体pGLE -416和pGLE -152; 然后将pGLE -152和pGLE -416分别与pRL-TK载体共转染HeLa细胞、EC109细胞和Vero细胞,通过检测相对荧光素酶活力,确认这些NGAL基因片段中是否含有启动子元件.结果与pGLE相比,pGLE -152在上述三种细胞中的相对荧光强度均明显增强(P<0.05),且在不同的细胞中增强的幅度明显不同.结论 NGAL基因的启动子位于-152～+84区段内,启动子的强弱具有细胞特异性,这可能与增强子的协同作用相关联.