大肠杆菌F18ac菌毛FedA蛋白的表达与鉴定

• 作者: 孙怀昌 徐建生 成大荣 王秋娟 高崧
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 大肠杆菌 菌毛 F18 FedA/ac 表达 鉴定
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 51-55
• 页数: 5页
• 分类号: S852.612
• 字数: 3956字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2005.06.014

摘要

根据已经发表的F18ac菌毛A亚单位的基因序列(FedA)设计一对引物,利用PCR技术从重组质粒T 8813A中扩增到一段序列,并按预定的阅读框插入表达性质粒载体pGEX-6p-1中的谷胱苷肽转移酶(GST)基因的下游,获得重组质粒pPFedA/ac,并转化大肠杆菌BL 21获得重组菌PPFedA/ac.琼脂糖凝胶电泳、序列测定及分析表明,该序列大小为456 bp,与已发表的FedA/ac结构编码序列完全一致.通过对菌体裂解物的SDS-PAGE分析以及Western-blotting鉴定,证明重组大肠杆菌PP FedA/ac的可以表达融合蛋白形式的FedA/ac(命名为GST- FedA/ac),即FedA/ac蛋白(15.317 ku)与谷胱苷肽转移酶(27.335 ku)相连组成分子量为42.652 ku的融合蛋白.利用GST-FedA/ac制备的兔抗GST-FedA/ac血清与大肠杆菌F107/86株(F18ab+)、2 134 P株(F18ac+)进行的玻板凝集试验呈现阳性反应,进一步表明了表达的正确性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙怀昌	扬州大学兽医学院	138	1042	15.0	25.0
2	徐建生	扬州大学兽医学院	68	560	13.0	19.0
3	高崧	扬州大学兽医学院	134	1223	19.0	27.0
4	成大荣	扬州大学兽医学院	93	628	13.0	19.0
5	王秋娟	扬州大学兽医学院	4	31	3.0	4.0