神经干细胞的体外培养及增强型绿色荧光蛋白基因转染研究

• 作者: 冯军峰 刘伟国 杨小锋 郑学胜
• 来源期刊: 浙江预防医学
• 学科: 医学
• 关键词: 神经干细胞 增强型绿色荧光蛋白 逆转录病毒载体
• 年，卷（期）: 2005,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 3-5
• 页数: 3页
• 分类号: R-33
• 字数: 2846字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-0931.2005.09.002

摘要

目的探索大鼠胚胎神经干细胞(NSCs)的体外培养,探讨NSCs作为基因靶细胞,以及逆转录病毒介导增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记NSCs的可行性.方法胚胎大鼠脑组织分离神经干细胞,无血清培养,免疫组织化学技术鉴定.用Lipofectin将pLEGFP-N1逆转录病毒载体导入PA317包装细胞,用G418筛选获得抗性细胞克隆,扩增抗性细胞并收集病毒上清;病毒上清感染神经干细胞,用G418筛选,荧光显微镜下观察并挑选EGFP表达最强的克隆,并做免疫组化鉴定;进一步培养扩增,做传代细胞的分化鉴定.结果培养出大鼠胚胎神经干细胞.荧光显微镜下检测感染逆转录病毒的神经干细胞,以及免疫组化鉴定,均显示EGFP获得良好表达;而且感染细胞能够被诱导分化为神经元和神经胶质细胞.结论大鼠胚胎神经干细胞能够在体外适宜的条件下进行长期培养;神经干细胞可直接作为基因靶细胞;利用逆转录病毒载体,建立稳定表达EGFP的神经干细胞系具有可行性,为进一步做标记细胞移植研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘伟国		112	539	11.0	17.0
2	冯军峰		4	17	2.0	4.0
3	杨小锋		71	463	12.0	18.0
4	郑学胜		8	33	4.0	5.0