反义DNA甲基化酶3b基因片断真核表达载体的构建及鉴定

• 作者: 刘民锋 左石 徐立宁 罗剑 董泾青 邹声泉 郭伟
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: DNMT3b 反义技术 表达载体 基因克隆 DNA甲基化
• 年，卷（期）: 2005,（26）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 7-9
• 页数: 3页
• 分类号: R394-33
• 字数: 2482字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2005.26.003

摘要

目的构建反义DNA甲基化酶3b(DNMT3b)基因片断真核表达载体,为研究DNMT3b基因功能提供工具.方法根据DNMT3b基因cDNA序列中编码序列设计PCR引物,在上下游引物5′端分别添加XbaⅠ和KpnⅠ酶切位点,RT-PCR从胆管癌细胞QBC-939中获得485bp的DNA片断;将该片断反向插入真核表达载体pcDNA3.1(+)的多克隆位点,构建反义DNMT3b基因片断真核表达载体,并用PCR、酶切法和DNA测序鉴定.结果 PCR鉴定得到467bp特异条带,双酶切鉴定得到471bp片断和5.4kb载体片断,DNA测序说明插入片断序列正确.结论本研究构建的反义DNMT3b基因片断真核表达载体可为进一步研究DNMT3b基因功能提供实验工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭伟		76	1055	18.0	29.0
2	左石		17	49	4.0	6.0
4	邹声泉	华中科技大学同济医学院	221	1228	15.0	22.0
5	董泾青		6	13	3.0	3.0
8	徐立宁		13	49	5.0	6.0
9	罗剑		14	60	5.0	7.0
10	刘民锋		6	31	3.0	5.0