重组人骨形态发生蛋白2在CHO细胞中的表达、鉴定及活性分析

• 作者: 吕树军 张道永 朱天慧 杨爽 闫继东
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 人骨形态发生蛋白2 CHO 共转染 C2C12 碱性磷酸酶
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 基因工程
• 页码范围: 968-972
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 4512字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2006.06.017

摘要

构建真核表达载体pCDNA3.1(+)-hBMP-2,与质粒pSV2-dhfr共转染CHO-dhfr-细胞,以含有700μg/mL G418的IMDM进行选择性培养,筛选抗性克隆,并用MTX扩增,提高rhBMP-2的表达量.收集的rhBMP-2蛋白进行Western blot检测,还原蛋白样品电泳产生一条大小约为18kD的特异性条带,非还原蛋白样品电泳产生一条大小约为30kD的特异性条带,提示表达的rhBMP-2是经过糖基化修饰的,且以同源二聚体形式分泌表达.单细胞分离培养得到14株rCHO(hBMP-2)单克隆细胞株,ELISA法检测rhBMP-2表达水平,最高可达7.83μg/24h/106cells.活性分析结果表明,表达的rhBMP-2具有很强的生物学活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨爽	南开大学医学院分子遗传学实验室	23	99	7.0	9.0
2	朱天慧	南开大学医学院分子遗传学实验室	21	90	6.0	9.0
6	闫继东	南开大学医学院分子遗传学实验室	4	37	4.0	4.0
7	张道永	南开大学医学院分子遗传学实验室	1	14	1.0	1.0
8	吕树军	南开大学医学院分子遗传学实验室	2	18	2.0	2.0