稳定表达细胞色素P4501A1人肝癌细胞系的建立

• 作者: 崔景荣 庞莉萍
• 来源期刊: 中国药科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: CYP1A1 Bel-7402 稳定转染 3-甲基胆蒽 二甲基苯并蒽
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 438-442
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 2641字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5048.2006.05.011

摘要

目的:建立稳定表达人细胞色素P4501A1(CYP1A1)的人肝癌细胞系(Bel-7402).方法:通过将人细胞色素P4501A1(CYP1A1)的表达质粒转染到人肝癌细胞系(Bel-7402),经G418抗性筛选得到稳定的克隆并扩大培养成系,Western Blotting检测蛋白的表达.细胞增殖试验鉴定CYP1A1的多环芳烃类底物二甲基苯并蒽(DMBA)对Bel-7402/1A1细胞的增殖抑制作用.双核微核实验对Bel-7402/1A1细胞进行了遗传毒理的短期实验.结果:转染后筛选得到的Bel-7402抗性克隆,Western Blotting检测表明有较高的CYP1A1蛋白表达.细胞暴露于DMBA时,Bel-7402/1A1与Bel-7402细胞相比,细胞增殖明显抑制.双核微核试验表明Bel-7402/1A1细胞的微核率随DMBA浓度增高而显著增加,Bel-7402无明显变化.连续传代后仍有CYP1A1标志酶EROD的较高表达,该酶活性能被CYP1A1抑制剂α-萘黄酮抑制.结论:建立了一个新的稳定表达CYP1A1的1个肝癌细胞系(Bel-7402/CYP1A1),可代谢多环芳烃化合物产生更大的毒性.该细胞系可用来筛选能被CYP1A1代谢的化合物,或能抑制CYP1A1活性的化合物,并可用来研究CYP1A1的催化性质及被CYP1A1代谢的化合物的毒性机理.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	崔景荣	北京大学医学部天然药物与仿生药物国家重点实验室	73	565	14.0	22.0
2	庞莉萍	北京大学医学部天然药物与仿生药物国家重点实验室	1	1	1.0	1.0