多重RT-PCR快速检测禽流感病毒的研究

• 作者: 乔宪凤 华文君 张涌 郑新民 陈思怀 魏庆信
• 来源期刊: 湖北农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 禽流感 反转录聚合酶链式反应 诊断
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 20-23
• 页数: 4页
• 分类号: S858.3|S855.3|S854.4+4
• 字数: 2837字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0439-8114.2006.01.005

摘要

参考H1-H15亚型禽流感病毒(AIV)的核蛋白(NP)基因序列以及H5、H6、H9亚型AIV血凝素(HA)基因,共设计4对引物,建立了2对引物扩增AIV的NP、HA基因的多重RT-PCR方法.应用此法分别对H5、H6、H9亚型AIV尿囊液RT-PCR,电泳,回收预期片段进行测序,并同Genebank的注册序列进行同源性分析.也对NDV、IBV、IBDV尿囊液以及3种亚型AIV尿囊液的2倍系列稀释样品进行检测.结果表明,3种亚型AIv尿囊液均出现2条特异性条带,经测序确证为目的扩增片段,BLAST的同源性初步判断3种AIV的亚型为H5N1、H6N2、H9N20对NDV、IBV、IBDV的RNA扩增未见2条目的条带,判断为阴性,说明该法特异性强:能对3种亚型AIV尿囊液64～128倍稀释的样品检测出AIV,表明其灵敏度高.该检测法检测的整个过程仅需4h,实现了AIV的快速检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	乔宪凤	湖北省农业科学院畜牧兽医研究所	34	197	8.0	12.0
2	华文君	湖北省农业科学院畜牧兽医研究所	32	164	8.0	10.0
3	郑新民	湖北省农业科学院畜牧兽医研究所	83	457	11.0	17.0
4	魏庆信	湖北省农业科学院畜牧兽医研究所	42	268	11.0	13.0