口蹄疫病毒结构蛋白P1-2A及蛋白酶3C基因的转基因番茄对豚鼠免疫反应的初步研究

• 作者: 吕建亮 孙元 张永光 方玉珍 潘丽 王宝琴 王文秀 王永录 王炜 蒋守田 谢庆阁
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 农学
• 关键词: 口蹄疫病毒 转基因番茄 免疫原性 豚鼠
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 297-303
• 页数: 7页
• 分类号: S852.65
• 字数: 5789字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-8721.2006.04.010

摘要

构建了O型口蹄疫病毒China99株结构蛋白P1-2A、非结构蛋白3C以及部分2B基因(P1-2X3C)的植物双元表达载体pBin438/P1-2X3C,通过农杆菌介导法转化番茄子叶,经卡那霉素抗性筛选,获得40余株抗性植株,对得到的抗性植株进行分子生物学检测,65%的再生植株PCR检测阳性;RT-PCR结果证实P1-2X3C基因在转基因番茄中能够有效转录;ELISA和Western blot检测表明转基因植株中表达的目的蛋白具有免疫反应性.转基因番茄叶片蛋白粗提液经肌肉途径免疫豚鼠,于第3次免疫后28d用100ID50/0.2mL的同源强毒攻击,结果表明口蹄疫病毒P1-2X3C基因的转基因番茄表达产物具有良好的免疫原性,豚鼠3免后血清效价可达1:64～1:128,攻毒后两组免疫豚鼠保护率分别达3/5和5/5.