亚洲1型口蹄疫病毒衣壳蛋白前体P1-2A基因和蛋白酶3C基因在昆虫细胞中的共表达

• 作者: 信爱国 廖德芳 张念祖 李乐 李华春 杨永钦 陈保善 高林
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 口蹄疫病毒 衣壳蛋白 昆虫细胞杆状病毒表达系统 表达
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 500-504
• 页数: 5页
• 分类号: R511
• 字数: 3988字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2008.06.004

摘要

目的 在昆虫细胞中表达亚洲1型口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus, FMDV)衣壳蛋白前体P1-2A基因和蛋白酶3C基因,为进一步研究FMDV空衣壳抗原和疫苗奠定基础.方法 从质粒pTOP-P1-2A和pTOP-3C中分别扩增出编码亚洲1型口蹄疫病毒衣壳蛋白前体P1-2A基因和3C蛋白酶基因,构建转移载体pDual-P1-2A-3C并与大肠杆菌(Escherichia coli)DH10Bac中的Bacmid质粒重组,构建重组转座质粒rBacmid-P1-3C.在脂质体介导下将rBaemid-P1-3C转染Sf9昆虫细胞获得重组杆状病毒.在Sf9昆虫细胞中共表达P1-2A和3C蛋白,通过SDS-PAGE、Western blot和Dot-ELISA试验鉴定重组蛋白.结果 目的基因在昆虫细胞中得到了正确的表达,表达蛋白与抗亚洲1型FMDV血清发生特异性反应.有良好的抗原性.结论 成功在昆虫细胞中表达亚洲1型口蹄疫病毒衣壳蛋白前体P1-2A基因和蛋白酶3C基因.