共表达O型口蹄疫病毒P12A+3C基因的重组杆状病毒的构建

• 作者: 刘在新 卢曾军 孙普 曹轶梅 田飞鹏 高云英
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 口蹄疫病毒 衣壳蛋白 重组杆状病毒 构建
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 4216字
• 语种: 中文

摘要

构建共表达O型口蹄疫病毒(Foot and mouth disease virus,FMDV) 衣壳蛋白前体P12A和蛋白酶3C的重组杆状病毒,为进一步研究FMDV 空衣壳抗原和基因工程亚单位疫苗奠定基础.从质粒T-OP1中扩增出编码O型FMDV衣壳蛋白前体的P12A 基因,并将其插入到杆状病毒转移载体pFastDual-3C的PH启动子之下,构建重组杆状病毒转移载体pD-P12A3C.通过在大肠杆菌内转座重组,获得重组杆粒B-P12A3C,转染Sf9细胞,获得表达O型FMDV衣壳蛋白的重组杆状病毒.重组杆状病毒经增殖并感染Sf9细胞后,通过双抗体夹心ELISA方法及间接免疫荧光来检测目的蛋白的表达.结果表明,表达产物能被O型FMDV阳性血清识别,具有一定的反应原性,表明重组杆状病毒构建成功,该研究为O型FMDV空衣壳的体外组装及基因工程亚单位疫苗的研究提供了前期材料.