口蹄疫病毒2C'3AB基因重组杆状病毒的构建及其表达

• 作者: 付元芳 刘在新 卢曾军 孙普 张小丽 曹轶梅 田美娜 谢庆阁 马小军
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 口蹄疫病毒 2C 3AB基因 重组杆状病毒 表达
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 483-488
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.6|Q786
• 字数: 4856字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2008.06.007

摘要

将含有口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白2C部分基因编码区及3AB完整基因编码区的基因片段2C'3AB重组于杆状病毒穿梭质粒pMelBac-B,经PCR、酶切及序列分析鉴定正确后,命名为pMel-2C'3AB.将重组穿梭质粒pMel-2C'3AB与杆状病毒骨架共转染Sf9昆虫细胞,通过噬斑筛选及PCR鉴定,构建了含有目的基因的重组杆状病毒.用该病毒感染High Five细胞,细胞裂解液的SDS-PAGE电泳结果显示,出现一约为43ku的蛋白带,与预期大小一致;Western-blotting结果表明,该表达产物能被FMDV阳性血清及2C'3AB单克隆抗体识别;间接ELISA结果显示,表达的目的蛋白能与牛、羊、猪的O型FMDV阳性血清发生特异性反应.证实,FMDV 2C'3AB基因在昆虫细胞中得到了表达,且表达产物具有良好的反应活性.