猪IgG H链基因CH2-CH3的克隆和分析

• 作者: 华修国 姚惠娟 姜法铭 崔立 曹海军 朱志盈 樊生超 缪德年
• 来源期刊: 上海农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪IgG H链基因 CH2-CH3 基因克隆 DNA序列分析
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 页码范围: 18-21
• 页数: 4页
• 分类号: S852.4
• 字数: 2514字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-3924.2006.04.005

摘要

根据已发表的猪IgG H链序列,设计了1对通用引物,从猪外周血淋巴细胞提取总RNA,经RT-PCR扩增IgGH链基因CH2-CH3序列,并克隆入pMD18-T Simple载体,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,经SalⅠ和Xba Ⅰ双酶切鉴定,筛选出阳性克隆.核酸序列测定分析表明,IgG H链基因CH2-CH3序列全长为669 bp,编码CH2-CH3的221个氨基酸和J区的1个脯氨酸.利用DNASTAR软件将其与猪IgG H链各CH2-CH3序列进行比较,发现其与U03778-1、U03779-2a、U03780-2b、U03781-3、U03782-4的核苷酸序列同源率分别为92.1%、98.4%、98.5%、93.0%和97.2%,推导的氨基酸序列同源率分别为86.5%、96.4%、96.5%、87.0%和94.2%.经进化树分析提示,该序列可能为一个新的亚型.