猴副流感病毒SV5 PCR检测方法的建立与初步应用

• 作者: 丛喆 于浩 佟巍 冯育芳 孙敏 涂新明 王卫 蒋虹 魏强
• 来源期刊: 中国实验动物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 猴副流感病毒SV5 聚合酶链反应 巢式PCR 检测
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 32-35
• 页数: 4页
• 分类号: Q939.47
• 字数: 3166字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4847.2006.01.009

摘要

目的建立检测SV5的PCR方法并加以初步应用.方法根据GenBank中报道的SV5序列,针对其中的SH基因设计引物进行PCR反应,扩增产物进行测序并用BLAST软件进行同源性比对,同时利用限制性内切酶的酶切反应以证实此PCR反应的特异性.在此基础上设计巢式PCR提高此方法的灵敏度.利用此方法对20份猴肾源细胞培养物和40份血清标本进行检测.结果利用设计的引物扩增出的序列测序结果证实与报道的SV5SH基因相对位置的序列一致.AccⅢ限制性内切酶可对PCR产物进行特异性酶切.巢式PCR比一次PCR的敏感度有所提高.用此方法检测的20份猴肾源细胞培养物和40份血清标本结果为阴性.结论初步建立了检测SV5病毒的PCR方法,排除实验室用20份猴肾源细胞培养物和40份血清标本SV5的污染.