牛副流感病毒3型RT-PCR方法的建立及初步应用

• 作者: 付瑞 岳秉飞 巩薇 李威 李晓波 王吉 王淑菁 王莎莎 秦骁 贺争鸣
• 来源期刊: 实验动物与比较医学
• 学科: 医学
• 关键词: 牛副流感病毒3型(BPIV3) PCR 牛源性样本
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 98-104
• 页数: 7页
• 分类号: R372|Q95-33
• 字数: 3774字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.02.004

摘要

目的 建立用于牛源性样本中牛副流感病毒3型(BPIV3)RT-PCR检测方法.方法 选择已发表的BPIV3神经氨酸酶(HN)基因高度保守区域作为靶基因,设计合成引物,建立BPW3 RT-PCR方法.并对方法的特异性、敏感性、重复性、稳定性等进行方法学评价.同时用建立的RT-PCR方法检测137份牛源性样本.结果 建立的BPIV3 RT-PCR方法与牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛鼻气管炎病毒(BHV-1)、仙台病毒(SV)均无交叉反应;可检测病毒最小滴度为6 lgTCID50/mL;BPW3cDNA在-30℃冰箱放置12个月仍可检测出目的条带;应用建立的方法检测137份牛源样本,核酸阳性率为14.6％.结论 建立的BPIV3荧光定量PCR检测方法具有快速、特异、敏感及稳定的特点,可用于牛源性样本中BPIV3核酸的检测.