荧光定量RT-PCR法检测运输应激猪热休克蛋白mRNA转录水平

• 作者: 李玉保 王志亮 赵茹茜 鲍恩东
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪 热休克蛋白 SYBR GreenI 荧光定量PCR 运输应激
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医
• 页码范围: 187-192
• 页数: 6页
• 分类号: S8
• 字数: 4458字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0578-1752.2006.01.027

摘要

[目的]探讨应激时热休克蛋白mRNA转录水平的变化.[方法]根据HSP90、HSP70和GAPDH mRNA序列,设计并合成引物,将PCR扩增的基因片段克隆到pGEM-T载体,重组质粒经筛选、鉴定,体外转录出RNA,梯度稀释作为阳性模板,用于标准曲线的制定和样品检测,建立了一步法实时荧光定量RT-PCR技术平台,并用于检测长途运输猪心脏和肝脏中HSP70及HSP90 mRNA转录水平的改变.[结果]经1、2、4、6和10 h的运输应激后,组织中HSP70 mRNA的转录水平随着运输应激时间的延长一直呈现出上升的趋势,运输应激到10 h时HSP70mRNA的转录水平升到最高,肝脏和心脏组织中HSP70 mRNA的转录水平分别为对照组的2.5和4.1倍;HSP90mRNA的转录水平则随着运输应激时间的延长呈下降趋势.[结论]运输应激可以影响HSP mRNA转录水平的变化,并且对不同家族的HSPmRNA转录水平的影响不同;HSP70 mRNA的转录水平有望成为猪运输应激的判定指标之一.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	鲍恩东	南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室	88	976	19.0	28.0
2	王志亮		79	832	16.0	24.0
3	赵茹茜	南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室	145	1909	24.0	36.0
4	李玉保	南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室	11	202	6.0	11.0