大鼠Desert Hedgehog基因的克隆和表达

• 作者: 刘靖 徐群渊 段德义 赵春礼 赵焕英 高福禄
• 来源期刊: 解剖学报
• 学科: 生物学
• 关键词: Desert Hedgehog基因 克隆 表达 逆转录聚合酶链反应 大鼠
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 545-548
• 页数: 4页
• 分类号: Q7
• 字数: 3378字
• 语种: 英文
• DOI: 10.3321/j.issn:0529-1356.2006.05.013

摘要

目的 克隆大鼠Desert Hedgehog(DHH)基因,构建其真核表达载体并转染PT67细胞;同时制备DHHcRNA正义及反义探针用于检测其在细胞中的表达.方法 提取SD大鼠睾丸总RNA,RT-PCR法扩增DHH-cDNA片段,连接于pGEM-T Easy载体,经测序后构建真核表达载体pLXSN/DHH并转染PT67细胞;重组质粒经限制性内切酶Not Ⅰ和Nco Ⅰ酶切、回收后,进行转录标记反应,原位杂交检测DHH在PT67细胞中的表达.结果 RT-PCR扩增得到1220 bp的片段;成功构建了真核表达载体pLXSN/DHH;制备DHH正义及反义探针浓度分别为150mg/L和80mg/L;DHH在PT67细胞中有表达.结论 克隆的DHH基因与大鼠Sertoli细胞的DHH基因相同,成功标记了特异、敏感的DHHcRNA探针,转染的DHH基因能够在PT67细胞中表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高福禄		98	478	12.0	16.0
2	徐群渊	首都医科大学北京神经科学研究所	140	593	11.0	17.0
3	赵焕英	首都医科大学北京神经科学研究所	55	178	7.0	11.0
4	段德义	首都医科大学北京神经科学研究所	29	70	4.0	6.0
5	赵春礼	首都医科大学北京神经科学研究所	45	182	8.0	11.0
6	刘靖	河北医科大学组织学与胚胎学教研室	4	5	1.0	2.0