辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶的表达与多克隆抗体制备

• 作者: 刘戈飞 宋旭红 杜昆 梁斌 黄东阳
• 来源期刊: 中国医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶 基因表达 多克隆抗体 免疫
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 227-229
• 页数: 3页
• 分类号: R392
• 字数: 3086字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0258-4646.2006.03.002

摘要

目的:制备辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶(NRDR)多克隆抗体.方法:应用大肠杆菌BL21-AI表达NRDR,制备NRDR包涵体,使用从SDS-PAGE凝胶中回收的重组NRDR作为免疫原,采用肩胛骨下注射作为免疫途径免疫兔.斑点杂交测定抗血清效价,HiTrap Protein G柱纯化兔IgG,免疫印迹鉴定抗体特异性.结果:BL21-AI对NRDR进行了高效表达.回收的NRDR蛋白溶液的浓度为0.36mg/ml,回收率为48.5%.所有免疫的动物在第2次追加免疫之后都产生了高效价的抗血清,血清的效价是1:500,检测极限是8ng NRDR蛋白.纯化后的NRDR抗体具有较高的免疫活性和特异性.结论:建立了高效制备辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶多克隆抗体的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘戈飞	中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室	26	107	6.0	9.0
3	黄东阳	汕头大学医学院分子生物学中心	51	423	10.0	19.0
6	宋旭红	汕头大学医学院分子生物学中心	23	87	6.0	8.0
7	杜昆	汕头大学医学院分子生物学中心	8	37	4.0	6.0
8	梁斌	汕头大学医学院分子生物学中心	14	51	4.0	6.0