SARS-CoV Spike蛋白受体结合区的表达及纯化

• 作者: 叶晓明 袁彩 黄明东
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: SARS-CoV ACE2结合区 果蝇S2细胞 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2006,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1108-1110
• 页数: 3页
• 分类号: R373
• 字数: 2085字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2006.12.005

摘要

目的 获得稳定表达SARS冠状病毒spike蛋白受体结合区的果蝇细胞系,表达spike蛋白受体结合区.方法 设计引物扩增spike蛋白受体结合区318-513片段,构建重组表达载体S318-pMT/Bip/V5-his,与pCoBlast质粒共转染果蝇S2细胞,经Blasticidin筛选得到的稳定重组细胞系,用硫酸铜诱导表达,Western-Blot检测表达产物.富集的表达产物用镍柱和RESOURCES阳离子交换树脂纯化,SDS-PAGE和Western-Blot检测纯化产物.结果 重组spike蛋白受体结合区可在果蝇S2细胞中分泌表达,且具有特异免疫反应性;经镍柱和RESOURCES纯化可得到纯度达90%以上的重组蛋白.结论 克隆并在真核生物中分泌表达出具免疫反应原性的spike蛋白受体结合区,镍柱和RESOURCES两步纯化可得到高纯度蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄明东	中国科学院福建物质结构研究所结构化学国家重点实验室	8	51	3.0	7.0
2	叶晓明	中国科学院福建物质结构研究所结构化学国家重点实验室	3	22	2.0	3.0
3	袁彩	中国科学院福建物质结构研究所结构化学国家重点实验室	4	43	2.0	4.0