SARS-CoV E、M和N蛋白克隆、表达及抗原性的研究

• 作者: 吴雪琼 张俊仙 栾翔凌 熊志红 王宾
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 原核表达 重组N蛋白 免疫原性 SARS 冠状病毒
• 年，卷（期）: 2009,（22）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 3378-3381,3385
• 页数: 5页
• 分类号: Q786|R392.7
• 字数: 4383字
• 语种: 中文

摘要

目的 获得大量SARS-CoV E、M和N重组蛋白,研究其抗原性.方法 应用基因工程技术构建pGEX4T-1/SARS-CoV E、M和N大肠杆茵工程茵,表达、纯化重组蛋白,通过Western blot分析其免疫反应性.结果 通过PCR扩增获得SARS-CoV E、M、N片断;以原核表达质粒pGEX4T-1为载体,构建了原核表达重组质粒pGEX4T-1/E、pGEX4T-1/M和pGEX4T-1/N.重组N蛋白在大肠杆菌系统中以可溶性形式大量表达,分子量约为71.97 kDa.Western blot分析证实,重组N蛋白可与pVAX1-N基因疫苗免疫的小鼠血清产生免疫反应.重组E蛋白和重组M蛋白表达量极低,分子量约为35kDa和46kDa. 结论成功地构建了SARS-CoV N大肠杆菌基因工程菌,能以可溶性形式高水平地表达重组N蛋白;该蛋白具有较好的免疫反应性和抗原特异性,可能成为SARS血清学诊断的候选抗原之一.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴雪琼	解放军第三九医院全军结核病研究所	70	631	15.0	20.0
2	张俊仙	解放军第三九医院全军结核病研究所	35	237	9.0	13.0
3	王宾		19	91	6.0	9.0
4	熊志红	解放军第三九医院全军结核病研究所	13	73	2.0	8.0
5	栾翔凌	解放军第三九医院全军结核病研究所	3	35	2.0	3.0