在原核细胞中重组人肝刺激因子的表达、纯化及其功能研究

• 作者: 吕瑾 安威 阳志成
• 来源期刊: 南华大学学报(医学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: 原核表达载体 人肝刺激因子 诱导表达 MTT检测 生物活性
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 基础论著
• 页码范围: 10-14
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 2954字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1116.2006.01.004

摘要

目的肝刺激因子(hepatic stimulator substance, HSS)在肝细胞中含量甚微、纯化困难,至今未分离到理想的生化纯品.利用DNA重组技术,进行人肝刺激因子(human HSS, hHSS)基因原核表达研究.方法 hHSS基因片段经PstⅠ和NdeⅠ消化后,定向插入至pT7-7载体相应位点.转化感受态细菌DH5α,通过限制性酶切图谱分析及DNA测序反应鉴定hHSS基因.再将pT7-7-hHSS表达载体转化到BL21(DE3)中,以IPTG诱导hHSS表达,通过超滤膜及阴离子交换柱纯化,获得目的蛋白,经蛋白印迹杂交及蛋白质肽指纹图谱分析鉴定hHSS.重组hHSS作用于BEL-7402细胞,利用MTT法检测其促增殖作用.结果 pT7-7-hHSS正确地表达了hHSS,纯化的rhHSS具促增殖作用,并呈现剂量-效应关系.结论通过构建pT7-7-hHSS原核表达体系,能正确高效地表达hHSS,且具有生物学活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	阳志成	首都医科大学细胞生物学系	9	14	2.0	3.0
5	安威	首都医科大学细胞生物学系	43	314	9.0	16.0
6	吕瑾	首都医科大学细胞生物学系	1	0	0.0	0.0