Smad2特异性siRNA转染肝星状细胞的效率检测

• 作者: 王忠裕 王洪江 罗海峰
• 来源期刊: 大连医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 肝星状细胞 肝纤维化 基因转染
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 171-173
• 页数: 3页
• 分类号: R73
• 字数: 2658字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7295.2006.03.004

摘要

[目的]提高siRNA表达载体在肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)中的转染效率.[方法]pEGFP-C1-CR4转染原代HSCs、HSC-T6细胞株,实验根据质粒DNA和阳离子脂质体的不同比例分为4组: 1 μg/0 μL、1 μg/1 μL、1 μg/2 μL、1 μg/4 μL,1 μg/0 μL为对照组,其余3组为实验组.转染48 h后,使用荧光显微镜观察转染情况,同时流式细胞仪计算转染效率.[结果] 质粒DNA和阳离子脂质体的比例为1 μg/2 μL和1 μg/4 μL时,原代HSCs转染效率为(56.55±3.12)%和(58.62±2.03)%(P>0.05) ,HSC-T6细胞株转染效率为(24.52±3.55)%和(25.49±2.33)%(P>0.05) .同样比例条件下,原代HSCs的转染效率显著高于HSC-T6细胞株的转染效率(P<0.0 5).在实验组质粒、脂质体比例为1 μg/2 μL和1 μg/4 μL时,同种细胞的转染效率均无显著差别(P>0.05).[结论]采用质粒DNA和阳离子脂质体的比例为1 μg/2 μL 、1 μg/4 μL的条件,均能够在HSCs和HSC-T6中获得最佳转染效率,但前者更为经济.