从贮存20年的微量细胞中提取DNA并做PCR分析的实验研究

• 作者: 张俭荣 赵雍凡 辛军平 陈国第
• 来源期刊: 四川肿瘤防治
• 学科: 医学
• 关键词: 食管拉网微量细胞 癌前病变 DNA提取 p53基因 聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 防治研究
• 页码范围: 157-160
• 页数: 4页
• 分类号: R730.2|R735.1
• 字数: 4512字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-0904.2006.03.001

摘要

目的:探讨从二十年前贮存的食管拉网微量细胞涂片中提取DNA并进行食管癌基因检测的方法和可行性,比较P53基因的突变在食管癌前期病变和正常食管上皮中的差异.方法:利用螯合型的离子交换树脂Chelex100作为介质,一步法从食管拉网脱落细胞提取DNA,应用PCR-SSCP方法和PCR-RFLP方法进行p53基因第5外显子及第7外显子的突变检测.结果:48例标本P53基因检测均获成功.食管上皮重度不典型增生细胞中发现有5例突变发生,均为p53基因第7外显子,而第5外显子未发现突变;正常食管鳞状上皮拉网脱落细胞中均未发现突变.检测到的5例突变中,其中有3例分别在10年、12年和14年后转变为食管癌.结论:Chelex100法能从微量细胞涂片中提取DNA,使对20年前食管拉网细胞涂片标本进行分子水平的检测成为可能.为食管癌前期病变的研究提供一种新的方法.p53基因的突变使食管上皮癌前期病变细胞具有了癌变趋势.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵雍凡	四川大学华西医院胸心血管外科	68	595	15.0	22.0
2	张俭荣	重庆三峡中心医院胸心外科	3	12	2.0	3.0
6	陈国第	四川大学基础医学与法医学院	3	2	1.0	1.0
7	辛军平	四川大学基础医学与法医学院	8	96	4.0	8.0