单纯疱疹病毒2gD-Hsp70融合蛋白基因的构建及表达

• 作者: 关蕾 杨慧兰 樊建勇 王颖
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 热休克蛋白70 gD蛋白 单纯疱疹病毒 疫苗
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 基因工程
• 页码范围: 914-918
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 4390字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2006.06.008

摘要

构建并原核表达Hsp70-HSV2gD融合蛋白.将Hsp70和HSV-2gD蛋白基因分别克隆到原核表达载体pGEX-4T-1, 构建成重组质粒pGEX-4T-Hsp70-gD, 并测序鉴定.重组质粒pGEX-4T-Hsp70-gD转化大肠杆菌DH5α后, IPTG诱导表达并进行 SDS-PAGE分析.表达产物纯化后做Western blot检测.将其肌注免疫BALB / c小鼠, 检测融合蛋白对免疫小鼠脾淋巴细胞增殖、γ-干扰素产生以及血清中gD IgG水平的影响.表达产物的SDS-PAGE分析发现,在相对分子量为118kD处有外源蛋白表达,与预期蛋白带一致.用GST柱得到了纯化的Hsp70-HSV2gD融合蛋白.Western blot证实,表达产物具有良好的活性.GST-Hsp70-gD组蛋白疫苗免疫的小鼠,其脾淋巴细胞刺激指数和脾淋巴细胞培养上清中γ-干扰素的水平高于其它组(P＜0.05).血清单纯疱疹病毒-2gD蛋白的抗体水平高于其它组(P＜0.05).

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨慧兰	广州军区广州总医院皮肤科	224	938	14.0	20.0
2	王颖	广州军区广州总医院皮肤科	24	54	4.0	6.0
3	樊建勇	广州军区广州总医院皮肤科	71	362	10.0	15.0
4	关蕾	广州军区广州总医院皮肤科	8	28	3.0	5.0