新城疫病毒F48E9株V基因的表达及其抗血清的制备

• 作者: 刘培欣 曹殿军 李景鹏 闫丽辉 韩放
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 新城疫病毒 V基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 微生物学
• 页码范围: 357-361
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.5|Q786
• 字数: 4753字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2006.05.004

摘要

采用PCR方法从鸡源新城疫病毒(NDV)强毒F48E9株P基因重组质粒中扩增出了V基因全长cDNA,并引进相应的突变位点,将其克隆到pMD18-T载体,然后亚克隆到原核表达载体pET-30c上,重组质粒经酶切、PCR鉴定及测序,筛选出阳性重组质粒,并命名为pET-30c-V.将pET-30c-V转化大肠埃希氏菌BL21(DE3),用1 mmol/L IPTG 37℃过夜诱导表达,SDS-PAGE及Western-blotting分析结果表明,所表达的NDV V重组蛋白主要以包涵体形式存在,分子质量约28 ku,与理论值大小相符.将包涵体用8 mol/L脲变性,经Ni-NTA柱纯化,透析复性,得到纯化的V蛋白.用复性后的V蛋白免疫21日龄SPF鸡(300μg/只),成功制备了抗鸡NDV V蛋白的抗血清.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李景鹏		96	990	17.0	28.0
2	闫丽辉	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室	22	280	6.0	16.0
3	曹殿军	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室	27	423	10.0	20.0
4	刘培欣	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室	21	302	7.0	17.0
5	韩放	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室	3	42	2.0	3.0