抗对虾白斑综合症病毒单链抗体P1D3基因在毕赤酵母中的分泌表达

• 作者: 张敏 张晓华 戴和平 杨毅 袁丽
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 毕赤酵母 对虾白斑综合症病毒(WSSV) 单链抗体 分泌表达
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 基因工程
• 页码范围: 973-978
• 页数: 6页
• 分类号: Q786
• 字数: 5211字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2006.06.018

摘要

为了将可中和对虾白斑综合症病毒(WSSV)的单链抗体P1D3在酵母中实现表达,以原核表达载体M13噬菌粒为模板,设计带有SnaBⅠ和EcoRⅠ酶切位点的特异性引物,通过PCR方法扩增P1D3基因.经过酶切、连接反应将该基因连入大肠杆菌-酵母穿梭质粒pPIC9K上.重组质粒pPIC9K-scFvP1D3 经 BglⅡ线性化后,用电转化的方法转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中.通过PCR和DNA测序,挑选和鉴定阳性克隆.经甲醇诱导,P1D3在酵母中获得分泌表达.ELISA实验结果表明,酵母表达上清液中的单链抗体具有较高的WSSV结合活性,而且其活性要高于大肠杆菌所表达抗体的活性.表达条件优化后,单链抗体在酵母中最高表达量可达302mg/L,为开展对虾被动免疫研究提供了新的抗体来源.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张晓华	中国科学院水生生物研究所	24	910	16.0	24.0
2	张敏	中国科学院水生生物研究所	184	2770	26.0	48.0
6	杨毅	中国科学院水生生物研究所	37	223	8.0	13.0
10	袁丽	中国科学院水生生物研究所	12	31	4.0	5.0
14	戴和平	中国科学院水生生物研究所	19	160	6.0	12.0